BD FACSCanto II TM 中文培训手册.pdf

发布时间：2022-06-16 发布人：admin 分类：说明书资料大小：1.18M 资料格式：pdf 举报版权申诉

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BD FACSCanto II TM 中文培训手册

目录 FACSCanto II 培训所需设备/试剂………………………………1 FACSCanto II 开机程序…………………………………………2 FACSCanto II 关机程序…………………………………………4 FACSCanto 临床软件进行仪器日常质控(QC)…………………5 运行 HLA-B27 校准………………………………………………7 CS&T 仪器性能状态自动监控……………………………………8 FACSCanto Clinical 四色免洗淋巴细胞亚群的绝对计数……12 FACSCanto Clinical 软件进行 HLA-B27 分析………………16 Diva 软件进行 HLA-B27 手动获取和分析……………………20 Simultest IMK 双色淋巴细胞亚群检测试剂盒演示双色试验样本获取和分析………………………………………………………22 Multitest IMK 淋巴细胞亚群检测试剂盒 Diva 软件检测…27 Application Setting………………………………………………30 多色分析自动补偿设置及应用…………………………………31 CompBeads 的应用………………………………………………32 Diva 软件进行单色及两色获取和分析…………………………33 DNA 测定…………………………………………………………34 FITC AnnexinV-PI 凋亡检测…………………………………38

FACSCanto 日常保养和维护……………………………………40 常见故障处理……………………………………………………45

FACSCanto II 培训所需设备/试剂 1. 普通低速离心机（实验要求为 300g,相当于 1000～1500rpm，可调转速调时间，能离心 12x75mm 的 5ml 试管)； 2. 固定或可调节的加样器及相应加样头若干：10ul,20ul,50ul, 100ul, 200ul,250ul， 450ul，1ml； 3. 旋涡混匀器； 4. 烧杯，三个清洁的玻璃或塑料带盖试剂瓶(50-100ml)； 5. 300 目过滤尼龙网； 6. 可放置 12x75mm 的 5ml 试管的试管架 2－3 个； 7. 鞘液和蒸馏水：0.22m 滤膜过滤； 8. 次氯酸溶液：有效氯浓度 0.5-1%； 9. 每天需要若干管 2ml 的抗凝的人血样本 (最好是 EDTA-K3 抗凝)； 10. 试剂与材料：CST beads、7 color setup beads、4 种不同颜色的 CD marker 抗体、 B27 检测试剂盒（临床）、Multiset 试剂盒（临床）、cell cycle 试剂盒、凋亡检测试剂盒、流式管以及绝对计数管。附 1：液流车： 20 升鞘液桶：FACSFlow 鞘液（货号 342003） 10 升废液桶：不要用其他容器替代，装入有效氯浓度 0.5-1%的次氯酸溶液 5 升清洗液桶：FACSClean solution 清洗液（货号 340345） 5 升关机液桶：FACS Shutdown solution 关机液（货号 334224） 1

FACSCanto II 开机程序 1、打开稳压器电源，打开位于仪器左侧的总电源，该总电源可以同时开启仪器、液流车以及激光电源。 2、启动计算机，在出现的登陆对话框中，输入用户名和密码，点击“OK”。观察桌面右下角系统时间旁的网络图标中有一个显示仪器与电脑已连接。 3、运行软件，双击桌面上的快捷方式。 BD FACSCanto 临床软件 BD FACSDiva 软件 4、在 BD FACSDiva 软件出现的登陆对话框中，无需输入用户名和密码，直接点击“OK”；在 BD FACSCanto 临床软件出现的登陆对话框中，输入密码（BDIS），点击“OK”。 5、在“仪器框”中确认软件已经和仪器相连接；如果有必要，选择 Cytometer>Connect； 6、在“仪器框”中查看液面水平，过低液面和已满废液显示红色。第 2 页

鞘液废液关机液清洗液 7、选择 Cytometer>Fluidics Startup 开启液路，出现显示进程的对话框。液路启动完毕（complete）后，点击“OK”。在液路启动的过程中，不要放上样品管，否则清洗液和废液会返流入样品管。液路启动程序会移去管道中关机液，用鞘液代替。 8、激光预热，完成后，会在“仪器框”的底部显示“system ready”（系统准备完毕）。 9、排除流动室中的气泡，选择 Cytometer > Cleaning Modes > De-gas Flow Cell，出现显示进程的对话框，点击“OK”，重复上述操作一次。检查这里有没有气泡 10、仪器可以开始工作。第 3 页

FACSCanto II 关机程序 1、用 1%次氯酸溶液高速冲洗 5 分钟，再用 DI water 高速冲洗 10 分钟（依据仪器使用情况，使用较多适当延长 DI water 冲洗的时间）； 2、在废液接收槽注射 2-3ml 蒸馏水，清洗废液接收槽残留的鞘液； 3、选择 Cytometer>Fluidics Shutdown（每周做一次，不做时可以选择退出软件，直接关仪器）；运行“关闭液路”程序将所有管路中的鞘液排出，并用清洗液和关机液清洗这些管道。此操作将避免液体管道由于盐的结晶而堵塞。 4、出现系统可以关闭的提示后，点击“OK”； 5、退出软件，关闭计算机； 6、关闭仪器总电源； 7、关闭稳压电源； 8、用棉签蘸蒸馏水擦拭上样针表面和上样感应器； 9、留有含 2-3ml 蒸馏水的流式管在上样针位置。第 4 页

BD FACSCanto 临床软件进行仪器日常质控（QC）在 BD FACSCanto 临床软件运行样本前，需要使用 BD FACSCanto 临床软件来运行自动化设置和 QC。利用 BD FACS 7 color setup beads 对检测器电压进行调节，把设置微球调整在预定的靶值位置，对检测灵敏度值进行测量，并且对荧光补偿值进行计算并保存荧光补偿值。使用 BD FACSCanto 临床软件中的 Levey-Jennings 功能，按时间追踪并监测流式细胞仪性能，留下参数的变化和趋势。 1．准备 7 color setup beads（货号 335775）：取一支 7 color setup beads 样本管，加配套稀释液至管子上的白色刻度线（约 1ml），充分混匀。注意：不要使用过期微球。如果使用过期微球可能导致错误的设置结果。 2．按每日开机程序打开流式细胞仪主机和电脑，打开 FACS Canto 临床软件并登陆，启动液路。 3．选择 Cytometer→Setup→Standard Setup。 4．在“Setup Lot Information”对话框中点击“New Lot ID”。 5．输入相应微球批号及失效期，并点击“OK”。 6．按照 7 color setup beads 试剂盒内带的信息卡上所显示的信息输入或检查 Lot ID、第 5 页

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